7. RUHSAT SAHİBİ

Can Radyofarmasötik Ürünler Sanayi ve Ticaret A.Ş.

8. RUHSAT NUMARASI

9. İLK RUHSAT TARİHİ / RUHSAT YENİLEME TARİHİ

10. KÜB’ÜN YENİLENME TARİHİ

11. DOZİMETRİ

Beyin sintigrafisi

Aşağıdaki tabloda "mTc-eksametazimin erişkinlere uygulanmasını takiben ICRP (International Commission of Radiological Protection, in Biomedical Research, Pergamon Press, 1991)’nin 62. yayınına göre hesaplanmış dozimetre yer almaktadır:

Effektif Doz: 4.7 mSv/500 MBq (70 kg vücut ağırlığı)

Teknesyum-99m ile işaretli lökositlerin in vivo lokalizasyonu

Aşağıdaki tabloda ICRP (International Commission of Radiological Protection, Radiation Dose to Patients from Radiopharmaceuticals, Pergamon Press, 1998.)’nin 80. yayınına göre hesaplanmış dozimetre yer almaktadır.

Organ

Erişkin

15 yaş

10 yaş

5 yaş

lyaş

Adrenal

1.0E-02

1.2E-02

1.8E-02

2.6E-02

4.3E-02

Mesane

2.6E-03

3.5E-03

5.2E-03

7.8E-03

1.4E-02

Kemik yüzeyi

1.6E-02

2.1E-02

3.4E-02

6.1E-02

1.5E-01

Beyin

2.3E-03

2.9E-03

4.4E-03

7.0E-03

1.3E-02

Meme

2.4E-03

2.9E-03

4.9E-03

7.6E-03

1.3E-02

Safra kesesi

8.4E-03

1.0E-02

1.6E-02

2.5E-02

3.6E-02

GI kanal

Mide

8.1E-03

9.6E-03

1.4E-02

2.0E-02

3.2E-02

ince bağırsak

4.6E-03

5.7E-03

8.7E-03

1.3E-02

2.1E-02

Kolon

4.3E-03

5.4E-03

8.4E-03

1.2E-02

2.1E-02

Kalın bağırsak üst kısmı

4.7E-03

5.9E-03

9.3E-03

1.4E-02

2.3E-02)

Kalın bağırsak alt kısmı

3.7E-03

4.8E-03

7.3E-03

1.0E-02

1.8E-02)

Kalp

9.4E-03

1.2E-02

1.7E-02

2.5E-02

4.4E-02

Böbrekler

1.2E-02

1.4E-02

2.2E-02

3.2E-02

5.4E-02

Karaciğer

2.0E-02

2.6E-02

3.8E-02

5.4E-02

9.7E-02

Akciğerler

7.8E-03

9.9E-03

1.5E-02

2.3E-02

4.1E-02

Kaslar

3.3E-03

4.1E-03

6.0E-03

8.9E-03

1.6E-02

Ozofagus

3.5E-03

4.2E-03

5.8E-03

8.6E-03

1.5E-02

Överler

3.9E-03

5.0E-03

7.2E-03

1.1E-02

1.8E-02

Pankreas

1.3E-02

1.6E-02

2.3E-02

3.4E-02

5.3E-02

Kırmızı kemik iliği

2.3E-02

2.5E-02

4.0E-02

7.1E-02

1.4E-01

Deri

1.8E-03

2.1E-03

3.4E-03

5.5E-03

1.0E-02

Dalak

1.5E-01

2.1E-01

3.1E-01

4.8E-01

8.5E-01

Testisler

1.6E-03

2.1E-03

3.2E-03

5.1E-03

9.2E-03

Timus

3.5E-03

4.2E-03

5.8E-03

8.6E-03

1.5E-02

Tiroid

2.9E-03

3.7E-03

5.8E-03

9.3E-03

1.7E-02

Uterus

3.4E-03

4.3E-03

6.5E-03

9.7E-03

1.6E-02

Diğer organlar

3.4E-03

4.2E-03

6.3E-03

9.5E-03

1.6E-02

Effektif doz (mSv/MBq)

1.1E-02

1.4E-02

2.2E-02

3.4E-02

6.2E-02

Effektif Doz: 2.2 mSv/200 MBq (70 kg vücut ağırlığı).

12. RADYOFARMASÖTİKLERİN HAZIRLANMASINA YÖNELİK TALİMATLAR

Radyofarmasötik preparatlar belirli kliniklerde, sadece yetkili kişiler tarafından alınmalı, kullanılmalı ve uygulanmalıdır. Ürünlerin alınması, saklanması, kullanımı, transferi ve imhası ulusal mevzuatla uyumlu olmalıdır (Bölüm 6.6’ya bakınız).

Radyofarmasötik uygulanması, dış radyasyon veya idrar dökülmesi, kusma v.s nedenleri ile bulaşma yüzünden diğer kişiler için risk oluşturur. Bu nedenle ulusal mevzuata uygun olarak, radyasyondan korunma önlemleri alınmalıdır.

Flakon içeriğinin sterilitesini sağlamak için aseptik tekniklerin kullanımına ve ay m zamanda radyasyon güvenliği önlemlerinin uygulanmasına dikkat edilmelidir.

Metod A. Bevin çalışması için:

99mTc-Brain-Spect’i intravenöz enjeksiyon için hazırlama işlemi

Tüm işlemler boyunca aseptik teknikler kullanınız.

1. Flakonu koruyucu zırhı içine koyunuz ve kapağı dezenfekte edici bir madde ile siliniz.

2. 10 mİ’lik enjektör kullanarak teknesyum-99m jeneratöründen alınan 5 mİ steril eluatı koruyucu zırhındaki flakona enjekte ediniz (Not 1- 6’ya bakınız). Enjektörü flakondan çıkarmadan önce çözeltinin üstündeki boşluk kısmından 5 mİ hava çekerek flakonun içindeki basıncı dengeleyiniz. Tozun tamamen çözünmesini sağlamak için koruyucu zırhın içindeki flakonu 10 saniye boyunca karıştırınız.

3. Verilen etiketi doldurunuz ve flakona yapıştırınız.

4. Total radyoaktiviteyi ölçünüz ve uygulanacak hacmi hesaplayınız.

5. Sulandırdıktan sonra ürünü 25 °C’nin altında ışıktan korunaklı bir şekilde saklayınız.

6. Sulandırdıktan sonra en çok 1 saat içinde kullanınız. Bu süre içinde "mTc-eksametazim kompleksinin total miktarı %80’nin altında olmamalıdır.

7. Kullanılmayan materyali atınız.

Not:

1. En yüksek radyokimyasal saflık için yeni sağılmış teknesyum-99m jeneratör eluatını kullanarak sulandırınız.

2. Sadece son 24 saat içinde sağılmış bir jeneratörden en fazla 2 saat önce elde edilmiş eluatı kullanınız.

3. Flakona en fazla 2.2 GBq teknesyum-99m eklenebilir.

4. Sulandırmadan önce, jeneratörden elde edilen eluat, doğru radyoaktivite konsantrasyonunun (5 ml’de maksimum 2.2 GBq) ayarlanması için enjeksiyonluk sodyum klorür ile dilüe edilebilir.

5. USP’de ve BP/Ph.Eur.da yer alan Sodium Pertechnetate (99mTc) Enjeksiyonu monograflarına uygun spesifikasyonlarda perteknetat kullanılmalıdır.

6. Hazırlanmış enjeksiyon/işaretleme ajanının pH’ı 9.0-9.8 arasında olmalıdır.

Method B. İn vitro Lökosit İşaretleme

99mTc-Brain-Spect’i lökosit işaretleme için hazırlama işlemleri:

Tüm işlemler boyunca aseptik teknikler kullanınız.

1. Flakonu koruyucu zırh içine koyunuz ve kapağı dezenfekte edici bir madde ile siliniz.

2. 5 mİ’lik enjektör kullanarak teknesyum-99m jeneratörden (Not a-f’ye bakınız) 3 ml’den fazla olmayacak şekilde steril eluatı zırh içindeki flakona enjekte ediniz. Enjektörü

flakondan çıkarmadan önce çözeltinin üstündeki boşluk kısmından 3 mİ hava çekerek flakonun içindeki basıncı dengeleyiniz. Tozun tamamen çözünmesini sağlamak için zırh içindeki flakonu 10 saniye boyunca çalkayınız.

3. Verilen etiketi doldurunuz ve flakona yapıştırınız.

4. Sulandırdıktan sonra ürünü 25 °C’nin altında ışıktan korunaklı bir şekilde saklayınız.

5. Sulandırdıktan sonra maksimum 1 saat içinde kullanınız. Bu süre içinde "mTc-eksametazim kompleksinin total miktarı %80’nin altında olmamalıdır.

6. Kullanılmayan tüm materyali atınız.

Not:

a) En yüksek radyokimyasal saflık için yeni sağılmış teknesyum-99m jeneratör eluatını kullanarak sulandırınız.

b) Sadece son 24 saat içinde sağılmış bir jeneratörden en fazla 2 saat önce elde edilmiş eluatı kullanınız.

c) Flakona 1.0-1.5 GBq teknesyum-99m eklenebilir.

d) Sulandırmadan önce jeneratörden elde edilen eluat, doğru radyoaktivite konsantrasyonunun (3 ml’de maks. 1.0-1.5 GBq) ayarlanması için enjeksiyonluk sodyum klorür kullanılarak dilüe edilebilir.

e) USP’de ve BP/Ph.Eur.da yer alan Sodyum Perteknetat (99mTc) Enjeksiyonu monograflarına uygun spesifikasyonlarda perteknetat kullanılmalıdır.

f) Hazırlanmış enjeksiyon/işaretleme ajanının pH’ı 9.0-9.8 arasında olmalıdır.

Lökositlerin ayrıştırılması ve bunu takiben in vitro koşullarda 99mTc-Brain-Spect ile işaretleme işlemi:

Tüm işlemler boyunca aseptik teknikler kullanınız.

1. İki nonheparinize, plastik 60 ml’lik enjektörün her birine 9 mİ asit-sitrat-dekstroz (ACD) (Not a’ya bakınız) çekiniz.

2. 19 G kelebek iğne infüzyon seti kullanarak her bir enjektöre 51 mİ hasta kanı çekiniz. Enjektörleri steril kapaklarla kapatınız.

3. 5 Universal kap veya tüpün her birine 2 mİ sedimentasyon ajanı (not b’ye bakınız) koyunuz.

4. İğneyi enjektörün ucuna takmadan, 20 mİ kanı sedimentasyon ajanı içeren 5 Universal tüpün her birine dağıtınız. Kalan 20 mİ kanı sedimentasyon ajanı içermeyen bir tüpe koyunuz. Kabarcık oluşumundan ve köpüklenmeden kaçınmak için kanı tüpün kenarından yavaşça aktarınız.

5. Tüpü bir kez yavaşça alt üst ederek kan ile sedimentasyon ajanının karışmasını sağlayınız. Universal tüpün kapağını çıkarınız ve üstte oluşan kabarcığı steril bir iğne kullanarak söndürünüz. Kapağı yerine takınız ve eritrosit sedimentasyonunun oluşması için tüpü 30-60 dakika bekletiniz.

Eritrosit sedimentasyonunun gerçekleşme hızı hastanın durumuna bağlıdır. İlke olarak, sedimente kırmızı hücreler, hacmin yarısına kadar sedimente olduğunda sedimentasyon durdurulmalıdır.

6. Bu arada sedimentasyon ajanı içermeyen tüpe konmuş 20 mİ kanı 10 dakika süreyle 2000 g’de santrifüj ediniz. Bu işlem sonucunda, içinde hücre içermeyen plazma (CFP) bulunan ACD supematant olarak elde edilir ve oda ısısında, hücre işaretlemesi ve yeniden enjeksiyon vasatı olarak kullanılması için tutulur.

7. Yeterli kırmızı hücre sedimenatasyonu meydana geldikten sonra ((5)’e bakınız), 15 mİ bulanık saman rengi supematantı dikkatli bir şekilde temiz Universal tüplere aktarınız. Herhangi bir sedimente eritrositi çekmemek için dikkatli olunuz. Supematant, lökositten ve plateletten zengin plazmadır (LRPRP).

Gereksiz hücre hasarına yol açmamak için, numune alma enjektörlerinin iğnelerini kullanmaktan kaçınınız.

8. LRPRP’yi 5 dakika boyunca 150 g’de santrifüj leyiniz ve supematant, plateletten zengin plazma (PRP) ve pellet olarak “karışık” lökosit pellet’i elde ediniz.

9. Mümkün olduğu kadar fazla PRP’yı temiz Universal tüplere alınız ve 10 dakika süreyle 2000 g’de daha fazla supematant (sedimentasyon ajanı içeren CFP) elde etmek üzere santrifüjleyiniz. Bu supematant işaretlemeden sonra hücreleri yıkamak için kullanılacaktır.

10. Bu arada “karışık” lökositleri içeren Universal tüplere çok yavaş tıklayarak ve döndürme hareketi yaparak pelletleri çözünüz. Ucunda iğne olmayan enjektörle tüm hücreleri tek bir tüpte toplayınız ve daha sonra aynı enjektörü kullanarak ACD içeren ama hücre içermeyen plazmadan (6. madde) 1 mİ ekleyiniz, yeniden süspansiyon haline gelene kadar çok yavaşça karıştırınız.

11. Yukarıda Metod B’de açıklanan işlemi kullanarak yaklaşık 1.0-1.5 GBq’lik "“TcCV içeren teknesyum-99m jeneratör eluatından 3 mİ ile bir flakon Brain-Spect’i sulandırınız.

12. Sulandırmadan hemen sonra elde edilen teknesyum-99m eksametazim solüsyonundan 2 mİ’yi CFP içindeki “karışık” lökosit tüpüne (10. madde) ekleyiniz.

13. Çok yavaşça karıştırınız ve 10 dakika boyunca oda sıcaklığında inkübasyona bırakınız.

14. Gerekli hallerde, teknesyum-99m eksametazimin radyokimyasal saflığını değerlendirmek için, belirtildiği şekilde kromatografi şeritlerini spotlayınız .

15. İnkübasyon tamamlandıktan sonra çok dikkatli bir şekilde lOml sedimentasyon ajanı içeren CFP’yı (madde 9) işaretlemeyi durdurmak için hücrelere ekleyiniz. Hücreleri çok nazikçe alt üst ederek karıştırınız.

16. 150 g’de 5 dakika süreyle santrifüj ediniz.

17. Tüm supematantı uzaklaştırınız ve saklayınız. Bu aşamada, bağlanmamış teknesyum-99m eksametazim içeren tüm supernatantın uzaklaştırılması kritiktir. Bu, en iyi şekilde, geniş çaplı bir iğne (19G) takılmış bir enjektörle yapılabilir.

18. Teknesyum-99m ile işaretli karıştırılmış lökosit preparatını 5-10 mİ, CFP içeren ACD (6) ile yeniden süspanse ediniz. Karıştırmak üzere yavaşça döndürünüz.

19. Hücrelerdeki ve supematanttaki (17) radyoaktiviteyi ölçünüz. İşaretleme etkinliğini (LE) hesaplayınız. Bu etkinlik, hücrelerdeki ve supematanttaki aktivitenin toplamının yüzdesi olarak tanımlanmıştır. LE, hastanın lökosit sayımına bağlıdır ve başlangıçtaki kan örneğinin hacmine göre değişir. Madde 2’deki hacimler kullanılarak LE’nin %55 civarında olması beklenebilir.

20. Bir iğne takmadan, işaretlenmiş hücreleri, plastik, heparin içermeyen bir enjektöre dikkatlice aktarınız ve steril bir kapakla kapatınız. Radyoaktiviteyi ölçünüz.

21. İşaretlenmiş hücreler artık yeniden enjeksiyon için hazırdır. Enjeksiyon derhal yapılmalıdır.

Not:

a) Asid-sitrat-dekstroz (ACD) aşağıdaki şekilde hazırlanmalıdır:

NIH Formül A. 1 litre için, 22 g trisodyum sitrat, 8 g sitrik asid, 22.4 g dekstroz ekleyiniz ve daha sonra enjeksiyonluk su ile 1 litreye tamamlayınız. Ürün mutlaka aseptik koşullarda imal edilmelidir. Ürünün ticari müstahzarları da bulunmaktadır. Ürün, üretici tarafından önerilen koşullarda saklanmalı ve sadece üretici tarafından bildirilen son kullanma tarihine kadar kullanılmalıdır.

b) %6 hidroksietil nişasta aseptik koşullarda imal edilmelidir. Ürünün ticari müstahzarları da bulunmaktadır. Ürün, üretici tarafından önerilen koşullarda saklanmalı ve sadece üretici tarafından bildirilen son kullanma tarihine kadar kullanılmalıdır.

Kalite kontrolü

1. "mTc-Brain-Spect’in radyokimyasal saflığının ölçülmesi (Metod I.-II.)

2. Ayrıştırılmış lökositlerin canlılığı

Metod I. Radyokimyasal saflığın ölçümü

Hazırlanmış eksametazim enjeksiyonunda üç potansiyel safsızlık bulunabilir. Bunlar; ikincil "mTc eksametazim kompleksi, serbest perteknetat ve indirgenmiş, hidrolize teknesyum-99m’dir. Enjeksiyonun radyokimyasal saflığının tayini için iki kromatografik sistemin kombinasyonu gereklidir.

Test numuneleri iğne ile iki Gelman ITLC/SG stribinin (2.5 cm x 20 cm) alt kısmından yaklaşık 2.5 cm’lik bir uzaklığa uygulanır. Bu stripler daha sonra hızla, hazırlanmış bulunan asendan kromatografi developman tanklarına yerleştirilir. Bu tanklardan biri bütan-2-one ve diğeri %0.9’luk sodyum klorür solüsyonu (1 cm derinliğinde, taze hazırlanmış solvent) içerir. 15 cm’lik elüsyondan sonra stripler çıkarılır, çözücü yürüme mesafeleri işaretlenir, stripler kurutulur ve uygun ekipman kullanılarak çözücünün aktivite dağılımı tesbit edilir.

Kromatogramların Yorumlanması

Sistem 1 (ITLC: bütan-2-one (metil etil keton))

İkincil "mTc eksametazim kompleksi ve indirgenmiş hidrolize teknesyum başlangıç noktasında kalır. Lipofilik "mTc eksametazim kompleksi ve perteknetat Rf 0.8-1.0’e göç eder.

Sistem 2 (ITLC: % 0.9 sodyum klorür)

Lipofilik "mTc eksametazim kompleksi, ikincil "mTc eksametazim kompleksi ve indirgenmiş hidrolize teknesyum başlangıç noktasında kalır. Perteknetat Rf 0.8-1.0’e göç eder.

1. Sistem 1 (%A)’dan gelen, hem ikincil "mTc eksametazim kompleksinin hem de indirgenmiş hidrolize teknesyum-99m aktivite yüzdesini hesaplayınız.

Sistem 2 (%B)’den gelen perteknetata bağlı aktiviteyi hesaplayınız.

2. Radyokimyasal saflık (lipofilik "mTc eksametazim kompleksi yüzdesi olarak) şu şekilde verilmiştir:

100 - (%A + %B):

%A, ikincil "mTc eksametazim kompleksi + indirgenmiş hidrolize uğramış teknesyum-99 düzeylerini ifade eder.

%B, perteknetat düzeyini tanımlar.

Sulandırmadan sonraki 60 dakika içinde alınan ve analiz edilen test örneklerinde radyokimyasal saflığın en az %80 olması beklenebilir.

Metod II.

İşaretlemenin kalitesi (radyokimyasal saflık) organik solvent ekstraksiyon metoduna göre kontrol edilebilir. Lipofilik "mTc-Brain-Spect yüzdesi bu metod kullanılarak tesbit edilebilir.

Materyaller ve gereçler

1. Şalin

2. Kloroform

3. Vorteks Karıştırıcı

4. Doz kalibratörü

Prosedür

1. 0.1 mİ işaretlenmiş bileşiği, 3 mİ kloroform ve 2.9 mİ şalin içeren bir flakona koyunuz.

2. Flakonu kapatınız, vortekste 1 dakika boyunca karıştırınız. Daha sonra 1-2 dakika ayrışma fazı için bekleyiniz.

3. Üst katmanı (şalin) bir başka flakona alınız ve her iki fazın (şalin flakonu ve kloroform flakonu) aktivitelerini bir doz kalibratörü kullanarak ayrı ayrı ölçünüz. Lipofilik "mTc-Eksametazim kloroform fraksiyonu içinde ve kontaminantlar şalin katmanının içinde bulunurlar.

4. Hesaplama

"mTc-Eksametazim’in yüzdesini hesaplayınız (radyokimyasal saflık):

Kloroform fraksiyonunun aktivitesi

% lipofilik "mTc-Eksameta zi m

X100

Her iki fraksiyonun toplam aktivitesi

60 dakika içinde radyokimyasal saflığın yüzdesi %80’nin altında olmamalıdır.

Canlılık:

Tripan mavisi kullanılarak lökositlerin canlılığı şu şekilde tayin edilebilir:

4:1 oranındaki % 0.2 Tripan mavisi rengi: % 4.25 sodyum klorür çözeltisi karışımı lökosit süspansiyonuna eklenmelidir. Hafif bir karıştırmadan sonra Burker tankına alınız.

Renkli çözelti hasarlı hücre membranından pasif difüzyonla geçebilir. B öylece hasarlanmış hücre, doğal, yaşayan hücrelere göre kıyaslandığında daha mavi renkli görünür.

Hücrelerin canlılığı, hasara uğramış mavi hücrelerin, doğal yaşayan hücrelere oranı ile gösterilir. Bu metodun kullanılması ile yaşayan hücrelerin oranı %90’dan fazla olmalıdır.

14